## L414-5KR 操作规程

检验依据：QAS-ZJ414-5KR-03

### 1. 相关物质及含量

#### 1.1. 色谱条件

色谱柱：C18, 250mm x 4.6mm x 5um
流速：1.0 mL/min
波长：210 nm
运行时间：40 min
后运行时间：13 min
柱温：25 °C
进样量：5 uL
流动相A：0.1% 磷酸水溶液
流动相B：甲醇

梯度程序：

| 时间(min) |  A%   |  B%   |
| :-------: | :---: | :---: |
|     0     |  50   |  50   |
|    10     |  25   |  75   |
|    18     |  25   |  75   |
|    25     |   5   |  95   |
|    40     |   5   |  95   |

#### 1.2. 样品配置

溶剂：甲醇
杂质储备液 1 ：称取 15mg L414-3KR 于 250mL 容量瓶中，定容。
杂质储备液 2 ：称取 10mg L414-4KR 于 100mL 容量瓶中，定容。
杂质储备液 3 ：称取 10mg L414-5IM 于 100mL 容量瓶中，定容。

LOQ 溶液：移取
        0.5mL 杂质储备液 1
        1.0mL 杂质储备液 2
        1.0mL 杂质储备液 3
于 100mL 容量瓶中，定容。

SST 溶液：称取 10mg 样品于 10mL 容量瓶中，加入
        0.5mL 杂质储备液 1
        0.2mL 杂质储备液 2
        1.0mL 杂质储备液 3
定容。

相关物质样品溶液：称取 10mg 样品（两份）于 10mL 容量瓶中，定容。
对照品溶液：称取 10mg L414-5KR 对照品（两份）于 100mL 容量瓶中，定容。
含量样品溶液：称取 10mg 样品（两份）于 100mL 容量瓶中，定容。

#### 1.3. 容量瓶用量

| 规格(mL) | 数量  |
| :------: | :---: |
|   250    |   1   |
|   100    |   7   |
|    10    |   3   |

每多一批样品则多加 2 个 100 mL 容量瓶、 2 个 10 mL 容量瓶

#### 1.4. 进样顺序

+ 空白
+ LOQ 溶液
+ SST 溶液
+ 相关物质样品溶液 1
+ 相关物质样品溶液 2
+ 空白
+ 对照品溶液 1-1
+ 对照品溶液 1-2
+ 对照品溶液 1-3
+ 对照品溶液 1-4
+ 对照品溶液 1-5
+ 对照品溶液 2
+ 含量样品溶液 1
+ 含量样品溶液 2
+ 对照品溶液 1-6

#### 1.5. 系统适用性要求

+ 样品溶液图谱中主峰保留时间于对照品一致
+ LOQ 溶液图谱中 L414-3KR、L414-4KR、L414-5IM 的 S/N ≥ 10
+ SST 溶液图谱中主峰的理论塔板数 ≥ 2000
+ SST 溶液图谱中主峰的拖尾因子 ≤ 2.0
+ SST 溶液图谱中 L414-3KR、L414-4KR、L414-5IM 与主峰之间的分离度 ≥ 1.0
+ 对照品溶液 1 前 5 针主峰峰面积 RSD ≤ 1.0%
+ 对照品溶液 1 与 对照品溶液 2 的 f 值之比在 99% - 101%

#### 1.6. 标准要求

+ 含量 98% - 102%
+ L414-3KR ≤ 0.3%
+ L414-4KR ≤ 0.2%
+ L414-5IM ≤ 1.0%
+ 最大未知杂质 ≤ 0.50%
+ 杂质总量 ≤ 2.0%
+ 纯度 ≥ 98%

### 2. 手性纯度

#### 2.1. 色谱条件

色谱柱：AD-H, 250mm x 4.6mm x 5um
流速：1.0 mL/min
波长：210 nm
运行时间：30 min
柱温：25 °C
进样量：5 uL
流动相：正己烷:0.2%三氟乙酸乙醇=90:10

#### 2.2. 样品配置

溶剂：乙醇
杂质储备液：称取 10mg L414-5S 异构体对照品于 100mL 容量瓶中，定容。
LOQ 溶液：移取 50uL 杂质储备液于 10mL 容量瓶中，定容。
SST 溶液：称取 10mg 样品于 10mL 容量瓶中，加入 0.5mL 杂质储备液，定容。
样品溶液：称取 10mg 样品于 10mL 容量瓶中，定容。

#### 2.3. 容量瓶用量

| 规格(mL) | 数量  |
| :------: | :---: |
|   100    |   1   |
|    10    |   3   |

每多一批样品则多加 1 个 10 mL 容量瓶

#### 2.4. 进样顺序

+ 空白
+ LOQ 溶液
+ SST 溶液
+ 样品溶液

#### 2.5. 系统适用性要求

+ LOQ 溶液图谱中 L414-5S 异构体的 S/N ≥ 10
+ SST 溶液图谱中 L414-5KR 的理论塔板数 > 2000
+ SST 溶液图谱中 L414-5KR 的拖尾因子 < 2.0
+ SST 溶液图谱中 L414-5S 与 L414-5KR 的分离度 ≥ 1.5

#### 2.6. 标准要求

+ 手性纯度 ≥ 99.5%

### 3. 干燥失重

#### 3.1. 条件

50 °C，抽真空

#### 3.2. 标准要求

干燥失重 ≤ 0.5%