## L414-7 操作规程

检验依据：QAS-ZJ414-7-06

### 1. 相关物质及含量

#### 1.1. 色谱条件

色谱柱：C18, 250mm x 4.6mm x 5um
流速：1.0 mL/min
波长：210 nm
运行时间：40 min
后运行时间：13 min
柱温：25 °C
进样量：10 uL
流动相A：10mM 磷酸二氢钾水溶液(用 KOH 调 pH=7.2)
流动相B：甲醇

梯度程序：

| 时间(min) |  A%   |  B%   |
| :-------: | :---: | :---: |
|     0     |  55   |  45   |
|    10     |  25   |  75   |
|    18     |  25   |  75   |
|    25     |   5   |  95   |
|    40     |   5   |  95   |

#### 1.2. 样品配置

**溶剂**：乙腈

**杂质储备液**：称取
         10mg L414-7 对照品
         10mg 三苯基氧膦
         10mg L414-6 氧化杂质
于 100mL 容量瓶中，定容。

**LOQ 溶液**：移取 100uL 杂质储备液于 100mL 容量瓶中，定容。

**SST 溶液**：称取 10mg L414-7 样品于 50mL 容量瓶中，加入 0.5mL 杂质储备液，定容。

**对照品溶液**：称取 10mg L414-7 对照品（两份）于 50mL 容量瓶中，定容。

**样品溶液**：称取 10mg L414-7 样品（两份）于 50mL 容量瓶中，定容。

#### 1.3. 容量瓶用量

| 规格(mL) | 数量  |
| :------: | :---: |
|   100    |   2   |
|    50    |   5   |

每多一批样品则多加 2 个 50 mL 容量瓶

#### 1.4. 进样顺序

+ 空白
+ LOQ 溶液
+ SST 溶液
+ 对照品溶液 1-1
+ 对照品溶液 1-2
+ 对照品溶液 1-3
+ 对照品溶液 1-4
+ 对照品溶液 1-5
+ 对照品溶液 2
+ 样品溶液 1
+ 样品溶液 2
+ 对照品溶液 1-6

#### 1.5. 系统适用性要求

+ 样品图谱中主峰保留时间与对照品应一致
+ LOQ 图谱中 L414-7、三苯基氧膦、L414-6 氧化杂质的 S/N ≥ 10
+ SST 图谱中 L414-7 的理论塔板数 ≥ 2000
+ SST 图谱中 L414-7 的拖尾因子 ≤ 2.0
+ SST 图谱中三苯基氧膦、L414-6 氧化杂质与主峰之间的分离度 ≥ 1.5
+ 对照品溶液 1 前五针主峰峰面积 RSD ≤ 1.0%
+ 对照品溶液 1 与对照品溶液 2 的 f 值之比在 99% - 101%

#### 1.6. 标准要求

+ 含量 98% - 102%
+ 三苯基氧膦 ≤ 0.5%
+ L414-6 氧化杂质 ≤ 0.5%
+ 最大未知杂质 ≤ 0.5%
+ 杂质总量 ≤ 1.5%
+ 纯度 ≥ 98.5%

### 2. 手性纯度

#### 2.1 色谱条件

色谱柱：AD-H, 250mm x 4.6mm x 5um
流速：1.0 mL/min
波长：210 nm
运行时间：20 min
柱温：25 °C
进样量：5 uL
流动相：正己烷:异丙醇=85:15

#### 2.2 样品配置

**溶剂**：异丙醇

**杂质储备液**：称取 10mg L414-7S 异构体对照品于 100mL 容量瓶中，定容。

**LOQ 溶液**：移取 50uL 杂质储备液于 10mL 容量瓶中，定容。

**SST 溶液**：称取 10mg L414-7 样品于 10mL 容量瓶中，加入 0.5mL 杂质储备液，定容。

**样品溶液**：称取 10mg L414-7 样品于 10mL 容量瓶中，定容。

#### 2.3 容量瓶用量

| 规格(mL) | 数量  |
| :------: | :---: |
|   100    |   1   |
|    10    |   3   |

每多一批样品则多加 1 个 10 mL 容量瓶

#### 2.4 进样顺序

+ 空白
+ LOQ 溶液
+ SST 溶液
+ 样品溶液

#### 2.5 系统适用性要求

+ LOQ 图谱中 L414-7S 异构体的 S/N ≥ 10
+ SST 图谱中 L414-7 的理论塔板数 ≥ 2000
+ SST 图谱中 L414-7 的拖尾因子 ≤ 2.0
+ SST 图谱中 R-异构体与 S-异构体的分离度 ≥ 1.5

#### 2.6 标准要求

+ 手性纯度 ≥ 99.5%

### 3. 干燥失重

#### 3.1. 条件

50 °C，抽真空

#### 3.2. 标准要求

干燥失重 ≤ 0.5%